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藍(lán)光切膠儀的測定步驟講解

更新時間:2025-06-24      瀏覽次數(shù):21
  藍(lán)光切膠儀通過LED藍(lán)光(波長通常為470nm左右)激發(fā)凝膠中染色的核酸或蛋白質(zhì)條帶,使其發(fā)出熒光以便觀察。與傳統(tǒng)的紫外透射儀相比,藍(lán)光具有更高的安全性(不損傷DNA/RNA),同時兼容多種染色劑(如EB替代染料、SYBR Green等)。部分儀器采用側(cè)面或底部光源設(shè)計,通過濾光片過濾雜光,提供均勻的藍(lán)色背景照明,使條帶清晰可見。
 
  藍(lán)光切膠儀的操作要點:
 
  1.染色選擇:優(yōu)先選用低毒或無毒熒光染料(如GelRed、SYBR Safe),避免使用高濃度EB,以減少污染風(fēng)險。
 
  2.光源調(diào)節(jié):根據(jù)凝膠厚度和熒光強(qiáng)度調(diào)整光強(qiáng),過亮可能導(dǎo)致條帶過曝,過暗則影響觀察。
 
  3.切割技巧:使用專用清潔刀具(如滅菌刀片或手術(shù)刀),在藍(lán)光下快速切入凝膠,盡量減少拖拽以免破壞條帶完整性。
 
  4.防護(hù)措施:雖然藍(lán)光無害,但長時間直視可能引起視覺疲勞,建議佩戴護(hù)目鏡并縮短單次觀察時間。
 
  5.設(shè)備維護(hù):定期清潔透光面板,避免染料殘留影響觀察效果;長期停用時需切斷電源。
 
  藍(lán)光切膠儀的測定步驟:
 
  1.準(zhǔn)備膠樣:將待分離的蛋白質(zhì)樣品通過電泳在瓊脂糖凝膠上進(jìn)行分離,分離完畢后,將膠樣放置在透明塑料薄膜上,并將其切割成需要的大小。
 
  2.操作設(shè)置:打開,并按照儀器說明書設(shè)置相應(yīng)的波長和電壓。
 
  3.進(jìn)樣:將切割好的膠樣放入切膠儀中,確保膠樣與光源保持適當(dāng)距離,以便觀察熒光。
 
  4.觀察與記錄:在藍(lán)光照射下,觀察膠樣中的熒光條帶,使用相機(jī)或手機(jī)拍攝記錄所需條帶的位置和大小。
 
  5.切膠:根據(jù)記錄的信息,使用專用切膠工具從凝膠中切取目標(biāo)條帶,注意避免污染和損傷其他部分。
 
  6.后續(xù)處理:將切取的膠條進(jìn)行進(jìn)一步的純化、分析或其他實驗操作。
藍(lán)光切膠儀
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